原位杂交检测实验
背景介绍：
原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。
原位杂交技术的基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列，将有放射性或非放射性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对，结合成专一的核酸杂交分子，经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的核酸序列必须具备3个重要条件：组织、细胞或染色体的固定，具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)，有与探针结合的标记物。
案例展示
原位杂交送样要求：
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样品类型 |
样品要求 |
保存条件 |
运输条件 |
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新鲜组织 |
新鲜取材组织，PBS清洗干净，-80℃保存； |
-80℃ |
干冰 |
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固定组织 |
尽量保持组织的原有形态，标注固定液类型和固定时间； |
常温 |
常温 |
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组织蜡块 |
组织由标准的石蜡盒包埋，尽量提供半年内的包埋蜡块； |
4℃ |
冰袋 |
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组织切片 |
防脱载玻片进行捞片，注明切片厚度，烤片温度和时间； |
4℃ |
冰袋 |
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细胞爬片 |
使用孔板专用的爬片，PBS清洗2-3次，封口膜封板，备注分组信息； |
常温 |
常温 |
